Раздел предназначен исключительно для медицинских и фармацевтических работников! Если Вы не являетесь медицинским и фармацевтическим работником - покиньте раздел! Условия использования
МОРФО-ГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ИЗОЛИРОВАННЫХ ПЕРИФЕРИЧЕСКИХ НЕРВОВ И СКЕЛЕТНЫХ МЫШЦ ПРИ ДЕЙСТВИИ ГИПЕРБАРИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Для морфологического изучения материал фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина и заливали парафином. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином, по Ван Гизону и Массону, после чего заключали в канадский бальзам. С целью проведения гистохимических реакций кусочки тканей замораживали в криостате, изготовляли продольные и поперечные срезы толщиной 15 мк (мышца) и 10 мк (нерв). Активность сукцинатдегидрогеназы (СДГ) определяли по методу Нахласа с нитро-синим тетразолием, основанном на том, что бесцветные водорастворимые тетразолиевые соединения при акцептировании ионов водорода превращаются в нерастворимые темные пигменты, известные под названием формазана. В тканях этот процесс осуществляется при участии СДГ, характеризующей уровень протекающих в них окислительно-восстановительных реакций. Количество и плотность гранул формазана прямо пропорциональны активности СДГ.
Исходя из особенностей метода гистохимического выявления СДГ и учитывая локализацию фермента на внутренней мембране митохондрий, по изменению его активности можно обнаружить не только метаболические сдвиги, но косвенно судить и о структурных изменениях в клетках.
С целью изучения реактивности мионевральных синапсов и состояния нервно-мышечных связей при действии высоких давлений на изолированные скелетные мышцы по методу Келле в модификации Гомори определяли активность ацетилхолинэстеразы (АХЭ) - фермента, катализирующего реакции гидролиза ацетилхолина в синапсе. Локализация АХЭ определялась по темно-коричневым отложениям сульфида меди. СДГ- и АХЭ-активность оценивали по величине светового потока, проходящего через продукты гистохимических реакций (гранулы формазана и кристаллы сернистой меди), с помощью микроскопа-фотометра MPV-2 фирмы «Letz» (ФРГ) в условных единицах оптической плотности. При этом величина светового потока была обратно пропорциональна активности СДГ и АХЭ.
Следующая глава:
Сравнительная оценка опытного материала с контрольными наблюдениями
Предыдущая глава:
Тяжесть поражения