Раздел предназначен исключительно для медицинских и фармацевтических работников! Если Вы не являетесь медицинским и фармацевтическим работником - покиньте раздел! Условия использования
Выделение фракции МСМ
Работа выполнена на половозрелых беспородных кроликах обоего пола, содержавшихся в стандартных условиях вивария, разделенных на опытную (17 животных) и контрольную (8 животных) группы. Поражение ПНС моделировали путем полной перерезки под гекоеналовым наркозом (внутривенно в дозе 70 мг/кг) седалищного нерва в верхней трети бедра. В асептических условиях рану послойно ушивали наглухо. Контроль - без операционного вмешательства. После появления выраженных трофических нарушений на пораженной конечности у опытных животных, которые возникали через 25-30 сут после операции, под наркозом быстро обнажали бедренную вену и после ее рассечения проводили забор крови в силиконированную пробирку в объеме 5 мл. Затем, после вскрытия грудной клетки, забирали такое же количество крови из полости левого желудочка сердца. Кровь сразу охлаждали в морозильной камере бытового холодильника до 0°С, после свертывания центрифугировали и полученные образцы сыворотки использовали в эксперименте.
Выделение фракции МСМ из сыворотки проводили методом колоночной хроматографии. В качестве неподвижной фазы использовали синтетический гель на основе акриламида - Акрилекс марки П-6 (фирма «Реанал»). Колонку 30X1.0 см набивали методом стационарного потока под избыточным (на 50% по сравнению с рабочим) давлением. Выбор геля был обусловлен требованием обеспечения резистентности к микробному росту при комнатной температуре, а также недопустимостью усадки при выполнении больших серий, что в отличие от сефадексов позволило провести все исследования в одинаковых стандартных условиях без переупаковки колонки. Для количественного определения содержания МСМ в сыворотке крови применяли метод непрерывного спектрофотометрирования вытекающего из колонки элюата при длине волны 254 нм. Был использован комплекс приборов на основе спектрофотометра Specord UV VS (ГДР), снабженного проточной кюветой, усилительным устройством и самописцем. Элюцию проводили 0,9%-ным раствором NaCl. Во всех опытах объем образца сыворотки составлял 1 мл.
Следующая глава:
Типичные хроматограммы
Предыдущая глава:
К ВОПРОСУ О ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ ЗНАЧИМОСТИ УРОВНЯ «СРЕДНИХ МОЛЕКУЛ» В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПРИ ПОРАЖЕНИИ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ ТРАВМАТИЧЕСКОГО ГЕНЕЗА