Раздел предназначен исключительно для медицинских и фармацевтических работников! Если Вы не являетесь медицинским и фармацевтическим работником - покиньте раздел! Условия использования
Типичные хроматограммы
Типичные хроматограммы образцов сыворотки крови кролика и человека (донор). Как видно из рисунка, в данных условиях сыворотки через матрицу геля Акрилекс наблюдается четкое разделение фракции «средних молекул» (заштрихованная область) от высокомолекулярных веществ сыворотки, причем фракция МСМ в виде компактного пика у кролика и двухкомпонентного пула у человека. Это, на наш взгляд, следует отнести к важному фактору видового различия: более широкий по молекулярному составу набор веществ среди МСМ у человека.
Количественную оценку содержания МСМ в сыворотке проводили методом интегрирования площади пика на, ограниченного снизу касательной к области фонового поглощения справа и слева от максимума. При этом площадь пика строго пропорциональна общему содержанию в элюате веществ, поглощающих свет с длиной волны регистрации (в нашем случае 254 нм). В проходящем свете на прозрачную, однородную по толщине плотную подложку в масштабе 1 : 1 наносили контуры пика и вырезали его по границам. После этого проводили взвешивание на аналитических весах «тени» пика. Условной единицей измерения количества МСМ служил 1 мг массы площади.
Результаты количественного анализа содержания МСМ в сыворотке крови опытных и контрольных кроликов с по месту забора крови. Протяженность пика на зависит как от количества МСМ в образце, так и от скорости элюции при прочих равных условиях (температура, компонентный состав, скорость записи на самописце и др.). Поскольку в использованном нами комплексе приборов линейная скорость записи хроматограммы не синхронизировалась с объемом вытекающего из колонки элюата, то не исключена вероятность искажения результатов исследования за счет изменения такого параметра, как скорость, которая могла снижаться за счет уплотнения геля в процессе проведения всей серии опытов. С учетом этого была предпринята математическая операция отнесения веса пика к его длине (в мм) на хроматограмме с последующей статистической обработкой по всем группам опытов, так как выявилась существенная вариация параметра / для различных образцов сыворотки.
Следующая глава:
Результаты количественного анализа
Предыдущая глава:
Выделение фракции МСМ