Раздел предназначен исключительно для медицинских и фармацевтических работников! Если Вы не являетесь медицинским и фармацевтическим работником - покиньте раздел! Условия использования
Изучение влияния температурных условий хранения
Изменения в форме пика МСМ на спустя 2 ч хранения образца при 25 °С. Некоторое смещение пика вправо связано, вероятно, с накоплением в сыворотке низкомолекулярных веществ, обусловленным действием гидролитических ферментов (протеазы, нуклеазы и др.). Следует, однако, отметить, что, несмотря на незначительное изменение формы пика МСМ в прогретом образце сыворотки, образцы для анализа предпочтительно хранить при низкой температуре, поскольку изменения в пептидном наборе веществ могут быть весьма значительными вследствие высокой активности в сыворотке протеолитических ферментов. Это предположение можно подтвердить регистрацией хроматограмм при 220 нм. Снижать температуру колонки и элюента при исследовании МСМ по предлагаемому в работе методу нецелесообразно, поскольку уже в верхней части колонки происходит отделение ферментативной части сыворотки от низкомолекулярной. Кроме того, повышение температуры сыворотки до уровня комнатной даже в течение 2 ч мало влияет на количество МСМ в образце.
С целью подтверждения выдвинутого в работе принципиально важного положения о влиянии травмы нервного ствола на количественный и качественный компонентный состав МСМ сыворотки крови нами был использован метод высокоэффективной жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД). Применяли отечественный хроматограф Милихром-2, снабженный колонкой 2,0X68 мм. Записывали ЖХВД-хроматограммы суммарной фракции МСМ из крови нормальных и опытных кроликов. Образцы для анализа получали путем лиофилизации всей фракции МСМ, выделенной из 1 мл сыворотки по описанному выше методу. Сухой остаток растворяли в 1 мл 60%-ного метанола и 10 мкл этого раствора хроматографировали на колонке с сорбентом Нуклеосил Сш (размер гранул 5 мкм) в режиме 80%-ным раствором метанола в воде.
Две выполненные в одинаковых условиях хроматограммы. В данном случае взяты образцы МСМ из сыворотки крови, оттекающей из бедренной вены денервиро-ванной конечности, в опыте и аналогично - в контроле. Видно, что компонентный состав МСМ при денервации мышц претерпевает существенные изменения: происходит вариация как количественных, так и качественных характеристик низкомолекулярных веществ в сыворотке.
Следующая глава:
Изменения в форме пика МСМ
Предыдущая глава:
Типичные электронные спектры