Раздел предназначен исключительно для медицинских и фармацевтических работников! Если Вы не являетесь медицинским и фармацевтическим работником - покиньте раздел! Условия использования
Задачей настоящего исследования
Антисыворотка для постановки реакции получена методом многоточечной внутрикожной иммунизации кроликов смесью специфических антигенов с полным адъювантом Фрейнда с содержанием антител к фиброзному антигену в титре 1 : 1280, к пульпозному - в титре 1 :2560, к антигену из нервной ткани - в титре 1 : 2560. Количество вводимого антигена - 25- 50 мкг на инъекцию. С целью предупреждения инфицирования кроликов в состав смеси добавляли антибиотики. Иммунизацию проводили 2 раза в неделю в течение 3,5-4 месяцев. Для удаления части общих антигенов типа пулом эритроцитов доноров.
Циркулирующие и связанные антигены определяли в сыворотке крови доноров и больных до и после обработки солянокислым цистеином соответствующих концентраций: 0,45 мг/мл для отщепления антигенов из ИК с иммуноглобулином класса G и 3,75 мг/мл для отщепления антигенов из ИК с иммуноглобулином класса М. Свежие сыворотки крови разводили двукратно в соответствующем растворе цистеина в боратном буфере (рН 8,3). После 5-часовой инкубации при температуре 37 °С и 18-часовой при температуре 4°С растворы диализовали против фосфатно-солевого буфера в течение 18 ч. В полученной жидкости определяли наличие антигена.
Качество сенсибилизации антигенами твердой фазы (планшеты) зависело от температурного и временного режимов. При температуре 37°С сенсибилизация в течение 30 и 60 мин была низкой, о чем свидетельствовали титры. При температуре 56 °С через 20 мин происходила достаточно высокая степень сенсибилизации (в связи с этим режим можно использовать в случае необходимости быстрого приготовления сенсибилизированных планшет). Однако при длительном (18 ч) контакте и температуре 4°С обнаружена оптимальная степень сенсибилизации, которая выражалась в титре стандартной сыворотки 1 : 2560. Следовательно, наиболее выраженная сенсибилизация твердой фазы антигенами межпозвонковых дисков и нервной ткани происходит именно при этих условиях.
Следующая глава:
Циркулирующие и связанные антигены
Предыдущая глава:
Исследована скорость медленной фазы