Раздел предназначен исключительно для медицинских и фармацевтических работников! Если Вы не являетесь медицинским и фармацевтическим работником - покиньте раздел! Условия использования
Среда Бека-Дорбоглава.
Для культивирования кишечных амеб применяется питательная среда Бека–Дорбоглава, которая готовится следующим образом.
1. Заранее приготовляется стерильная посуда (бутыль со стеклянными бусами, воронка, пипетки Мора и пробирки).
2. Берут 4 свежих куриных яйца и тщательно обмывают их 96° спиртом, затем стерильным пинцетом на полюсах яйца делают дырочки и содержимое через воронку выпускают в бутыль с бусами.
3. В бутыль добавляют 50 мл стерильной жидкости Локка (состав ее следующий: дистиллированной воды - 1000 мл, NaHC03 - 0,2 г, СаС12 - 0,2 г, КС1 - 0,4 г, NaCl - 9,0 г и глюкозы - 2,5 г; устанавливают рН - 7,4).
4. Смесь тщательно встряхивается в течение 3-5 минут и стерильной пипеткой Мора разливается по 3-4 мл в каждую пробирку.
5. Для получения косой поверхности среды пробирки наклонно помещают в аппарате для свертывания при +70° до тех пор, пока среда не затвердеет.
6. Затвердевшая среда стерилизуется в автоклаве в течение 20 минут при давлении в 1 атм. и затем в течение суток проверяется на стерильность.
7. К твердой части среды добавляется жидкая, представляющая смесь из 8 частей локковской жидкости и 1 части инактивированной человеческой сыворотки (последняя может быть заменена лошадиной). Указанная смесь наливается на 1 см выше твердой части скошенной среды; рН жидкой части 7,2-7,6.
8. Проверяется на стерильность. После этого среда готова для посевов.
9. Перед посевом в пробирку добавляется 1-2 петли стерильного рисового крахмала (стерилизация сухим жиром).
Для посева (если кал твердый и оформленный) стерильной стеклянной палочкой берется небольшой кусочек, величиной с горошину, и измельчается в пробирке с жидкой частью среды. Если фекалии жидкие, то материал набирается пипеткой и прямо засевается. Рост в термостате при температуре 37°. Пересевы вначале ежедневно, а затем через сутки.
В последние годы предложено много других питательных сред.
Следующая глава:
Питательная среда для жгутиконосцев
Предыдущая глава:
Культивирование кишечных простейших