ФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ ИММУНОЦИТОХИМИЯ В ИССЛЕДОВАНИИ ЭКССУДАТОВ ИЗ СЕРОЗНЫХ ПОЛОСТЕЙ ПРИ СРОЧНЫХ ИНТРАОПЕРАЦИОННЫХ ИССЛЕДОВАНИЯХ
н. н. Волченко, О. В. Борисова
МНИОИ им. П . А. Герцена, г. Москва, Россия
В настоящее время все большее значение имеет выявление опухолевых клеток при срочном интраоперационном исследовании экссудатов в связи с внедрением новых методов лечения, таких как интраоперационная внутриплевральная и внутрибрюшная химиотерапия, интраоперационная гипертермическая химиотерапия, фотодинамическая терапия брюшины и плевры До последнего времени исследование экссудатов осуществляли только традиционными методами световой микроскопии, которые часто оказываются малоэффективными Реальное представление о степени распространенности процесса дают результаты иммуноморфологического исследования. Используя иммуноцитохимическое (ИЦХ) исследование экссудатов иммунопероксидазным методом с применением эпителиального маркера Ber-EP4, нами показано, что при аденогенном раке в 79% наблюдений подтверждается диссеминация опухоли, заподозренная рутинным цитологическим исследованием, в 15% выявляются немногочисленные опухолевые комплексы, не диагностируемые при рутинном цитологическом исследовании, а в 7% удается избежать гипердиагностики опухолевого процесса. Срочное ИЦХ исследование иммунопероксидазным методом достаточно трудоемкая процедура (минимум 40 мин) . Наше исследование показало, что флуоресцентная ИЦХ (ФИЦХ) экссудатов является новым надежным и быстрым методом диагностики характера экссудата. Особенно перспективно применение этого метода при срочных интраоперационных исследованиях экссудатов, так как не требует сложной предподготовки материала и значительных временных затрат: исследование занимает 20 мин
Цель исследования — показать возможности ФИЦХ в выявлении опухолевых клеток в экссудатах из серозных полостей .
Материалы и методы . Методом ФИЦХ исследовано 60 экссудатов из серозных полостей В исследовании применяли эпителиальный маркер Ber-EP4 FITS (клон Ber-EP4) фирмы «DAKO», который вносили непосредственно в осадок центрифугата. Препараты готовили рутинным способом и жидкостные с помощью центрифуги Cytospin 3. Для визуализации ядер клеток препараты окрашивали DAPI. Микроскопию осуществляли на флуоресцентном микроскопе ImagerM1 фирмы «Karl Zeiss». Методом ФИЦХ исследовано 60 экссудатов: 10 — при РМЖ, 18 — при перстневидноклеточном раке желудка, 4 — при аденокарциноме толстой кишки, 10 — при серозном раке яичников, 4 — при пограничных опухолях яичников, 4 — при аденокарциноме легкого, 10 — при неопухолевых заболеваниях . Во всех наблюдениях при цитологическом исследовании возникли сложности в установлении характера экссудата . Опухолевые клетки выявлены в 74% наблюдений, причем в 59% наблюдений при цитологическом исследовании высказывалось лишь подозрение на наличие опухолевых клеток, а в 15% наблюдений экссудаты изначально расценены как реактивные . Наибольшие сложности при исследовании экссудатов возникают при перстневидноклеточном раке желудка (гистиоцитарном, эозинофильном, мелкоклеточном и анапластическом вариантах) и пограничной опухоли яичников . Отсутствие при рутинном цитологическом исследовании экссудатов опухолевых клеток является показанием к проведению ФИЦХ.
Таким образом, показана высокая эффективность и быстрота ФИЦХ экссудатов с эпителиальным маркером Ber-EP4 при срочных интраоперационных исследованиях экссудатов с целью установления распространенности опухолевого процесса.
Следующая глава:
ХИРУРГИЧЕСКАЯ КЛАССИФИКАЦИЯ ЭМФИЗЕМЫ ЛЕГКИХ
Предыдущая глава:
МЕТОД ЭФФЕКТИВНОЙ ПРОФИЛАКТИКИ НЕСОСТОЯТЕЛЬНОСТИ КУЛЬТИ БРОНХА