Раздел предназначен исключительно для медицинских и фармацевтических работников! Если Вы не являетесь медицинским и фармацевтическим работником - покиньте раздел! Условия использования
Реакция связывания комплемента
Для приготовления антигена готовилась 10% вирусная суспензия на физиологическом растворе с добавлением 2% инактивированной сыворотки морской свинки. Она выдерживалась 18 часов при температуре 4°. Затем суспензия центрифугировалась при 2000 оборотах в минуту в течение получаса и надосадочная жидкость подвергалась повторному пятикратному замораживанию при 70° в смеси твердой углекислоты со спиртом и оттаиванию при 37° в водяной бане. Образующийся при этом флокулят осаждался центрифугированием при 3000 оборотов в минуту в течение часа. Готовый антиген представляет собой прозрачную, слегка опалесцирующую жидкость. В качестве консерванта добавлялся мертиолят в концентрации 1 : 10 000. Антиген хранился в леднике при температуре 4°. Все вирусы, которые мы использовали для приготовления антигенов, были одинакового титра Ю-5.
Для реакции связывания комплемента использовали те же сыворотки, которые испытывались в реакции нейтрализации, т. е. взятые у животных на 10-й, 20-й и 30-й день после окончания иммунизации. Перед опытом сыворотки инактивировались при 65° в течение 20 минут. В каждом опыте мы ставили перекрестную реакцию связывания всех антигенов (ОЭМч, тоб. ЭсчЛ и ЭМЛ бешенства) с соответствующими сыворотками. Сыворотки брали в разведениях от 1:4 до 1 :64, антигены употребляли неразведенными. Связывание проводилось на холоду, при температуре 2-4°, в продолжение 18-20 часов.
Как видно антитела, связывающие комплемент, обнаруживаются при помощи реакции связывания комплемента в сыворотках иммунизированных животных как по отношению к своему гомологичному вирусу (через 10, 20 и 30 дней после иммунизации животных), так и к другим гетерологичным вирусам.
Следующая глава:
При перекрестном испытании иммунитета
Предыдущая глава:
В отношении американского ЭМЛ